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CAS号：298-96-4
分子式：C19H15ClN4
分子量：334.8
纯度：>98%
保存：-20℃

2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又称四唑红，简称TTC，TTZ，或TPTZ，一种脂溶性光敏感复合物，即可用来检测种子的生存能力，也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF(1,3,5-triphenylformazan)。对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%(w/v)(货号：KD1884)，也可根据组织类型做浓度的适当调整。
染色方法
染色工作液的配制
TTC通常用磷酸缓冲盐溶液来配制，pH范围为6.5～7.5之间，常用的工作浓度为2%，也可用1%或者更低的浓度，根据自身实验体系调整。
可使用以下的缓冲盐体系配制：
1、取9.078g KH2PO4(Mw：136.09)溶于1L去离子水内，制备成66.7mM KH2PO4储存液；取9.472g Na2HPO4·H2O(Mw：137.99)溶于1L去离子水内，制备成68.6mM Na2HPO4储存液；将两份KH2PO4储存液与1份Na2HPO4储存液充分混合，即得到需要的磷酸缓冲液溶液。
2、根据需要的TTC工作液浓度来制备，如加入2g TTC粉末到100mL混合的磷酸盐缓冲液中，即得到2%的染色工作液。此时的溶液pH值在6.5～7.5之间。此工作液可装到不透明的白色瓶或者棕色瓶子内，4℃保存几个月稳定。
注意：TTC染色液的缓冲体系可根据自己的实验习惯来调整；也可用去离子水来溶解配置成10mg/ml的储存液，过滤除菌，建议此法染色液当天使用。
使用方法：
1、取材：动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏)，不经固定液固定，将组织直接放入-20℃速冻20～30min，如果不急用，可以暂时放置-80℃冻存。
2、组织块切片：将冻好的组织稍解冻，用莱卡刀片手动切片，厚度2～3mm为宜，切面整齐。
3、TTC染色：将切片放入提前预热好的的TTC染色液中，放入37℃水浴锅中避光孵育15～30min，间隔5～8min轻轻摇动组织，使其均匀接触到染色液，并观察染色结果。
4、拍照：组织成色后，加入固定液终止反应，并避光保存组织，照相机拍照。
染色判读：
组织正常区呈红色，梗死区呈苍白色。
注意事项：
1、标本越新鲜越好，勿固定，刀片宜薄而锋利，在冰箱中速冻的时间以能顺利切片为宜，保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于固定液中避光保存，染色结果能保存数月，在阳光下易褪色；
3、TTC染色液避光4℃可保存一个月，使用前先复常温。
相关搜索：TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑/红四氮唑)，298-96-4